产品货号：
WH0152
中文名称：
新型高通量96孔板植物基因组DNA提取试剂盒
英文名称：
96wells Plant Genomic DNA Extraction Kit
产品规格：
2×96孔
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附板和独特的缓冲液系统，提取多种植物组织中的基因组DNA。离心吸附板中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，高效、专一吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白。提取的基因组DNA片段大，纯度高，质量稳定可靠。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
产品特点：
·简单快速：操作简单，90min内即可获得高品质基因组DNA。
·安全可靠：无需使用酚氯/仿等有毒试剂抽提，每次均可获得理想的效果。
·纯度高，质量好：100mg植物组织可提取到3-30μg基因组DNA，OD260/OD280比值在1.7-1.9范围内。
·自动化：可配合大部分核酸自动纯化仪。
储存条件：室温（15-25℃）干燥条件下可保存12个月；更长时间的保存可置于2-8℃。在2-8℃保存条件下，若产生沉淀，使用前应先将试剂盒内的溶液在室温中放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10 min，以溶解沉淀。
注意事项：请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。
1．样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
2．缓冲液LP1可能发黄，并不影响提取效果。
3．若缓冲液LP1或LP2有沉淀析出，可在37℃水浴溶解，摇匀后使用。
4．所有离心步骤均为使用台式离心机，室温下离心。
操作步骤：（离心法）
使用前请先在缓冲液LP3和漂洗液PW中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。
1．处理材料：
取植物新鲜组织100mg或干重组织30 mg，加入液氮充分碾磨。往研磨好的每个样本中加入400μl缓冲液LP1和6 μl RNase A（10 mg/ml)，旋涡振荡1 min，室温放置10 min。
注意：为避免组织还潮，当样本量大时，可提前按上述比例预混缓冲液LP1和RNase A。
2．加入130 μl缓冲液LP2，充分混匀，旋涡振荡1 min。
3．12000rpm（~13400×g )离心5 min。
4．将上述离心后的上清液，转移至96孔过滤板，96孔过滤板置于96孔深孔板上，加盖封口膜。3600rpm（~2,130×g)离心10 min，收集滤液至96孔深孔板。
注意：如果有未研磨彻底的植物组织或可能造成堵孔的大的碎片，请不要转移至96孔过滤板，否则有堵孔的危险。
5．加入滤液1.5倍体积的缓冲液LP3（例如500 μl的滤液加750 μl缓冲液LP3) （使用前请检查是否已加入无水乙醇)，加盖封口膜，立即充分振荡混匀15 s（或用排枪吹打混匀)，此时可能会出现絮状沉淀。
6．将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个96孔吸附板CB3中（吸附板已放置在96孔深孔板)，加盖封口膜。3600rpm（~2,130×g)离心5 min，倒掉废液，96孔吸附板CB3重新放回96孔深孔板。
7．向96孔吸附板CB3中加入600 μl漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，加盖封口膜。3600rpm（~2,130×g)离心5 min，倒掉废液，将96孔吸附板CB3重新放回96孔深孔板。
8．向96孔吸附板CB3中加入600 μl漂洗液PW，加盖封口膜。3600rpm（~2,130×g)离心5 min，倒掉废液。
注意：如果吸附板膜呈现绿色，向96孔吸附板CB3中加入500 μl无水乙醇，3600rpm（~2,130×g)离心5 min，倒掉废液，将96孔吸附板CB3放回96孔深孔板。
9．将96孔吸附板CB3放回96孔深孔板中，3600rpm（~2,130×g)离心5 min，倒掉废液。将96孔吸附板CB3置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
注意：这一步的目的是将吸附板中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
10．将96孔吸附板CB3转入一个干净的96孔深孔板中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200 μl洗脱缓冲液TE，室温放置2-5 min，3600rpm（~2,130×g)离心8 min，将溶液收集到96孔深孔板中。
注意：为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附板CB3中，室温放置2min，3600rpm（~2,130×g)离心8 min。洗脱缓冲液体积不应少于50 μl，体积过小影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。
操作步骤：（负压法）
使用前请先在缓冲液LP3和漂洗液PW中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。
1．处理材料：
取植物新鲜组织100mg或干重组织30 mg，加入液氮充分碾磨。往研磨好的每个样本中加入400μl缓冲液LP1和6 μl RNase A（10 mg/ml)，旋涡振荡1 min，室温放置10 min。
注意：为避免组织还潮，当样本量大时，可提前按上述比例预混缓冲液LP1和RNase A。
2．加入130 μl缓冲液LP2，充分混匀，旋涡振荡1 min。
3．12000rpm（~13400×g )离心5 min。
4．正确连接负压装置，将96孔过滤板CS置于负压装置上，下面放置一个新的96孔深孔板，将负压压力调节至40-70 kpa；将上述离心后的上清液，转移至96孔过滤板CS，打开负压装置开关，抽滤2 min。
5．向收集滤液的96孔深孔板加入滤液1.5倍体积的缓冲液LP3（例如500 μl的滤液加750 μl缓冲液LP3）（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），排枪抽打混匀。
6．将96孔过滤板CS从负压装置上取下，96孔吸附板CB3置于负压装置上，下面放置废液槽，将上一步骤的所有液体及沉淀转移至96孔吸附板CB3，打开负压装置开关，抽滤5 min。
7．向96孔吸附板CB3中加入600 μl漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），打开负压装置开关，抽滤2 min。
8．向96孔吸附板CB3中加入600 μl漂洗液PW，打开负压装置开关，抽滤5 min。
9．关掉负压装置开关，清理废液槽，将96孔吸附板CB3室温放置3 min。
10．96孔吸附板CB3置于负压装置上，下面放置一个新的96孔深孔板，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200 μl洗脱缓冲液TE，室温放置2-5 min，打开负压装置开关，抽滤3-5 min。
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产品特点：
·简单快速：操作简单，90min内即可获得高品质基因组DNA。
·安全可靠：无需使用酚氯/仿等有毒试剂抽提，每次均可获得理想的效果。
·纯度高，质量好：100mg植物组织可提取到3-30μg基因组DNA，OD260/OD280比值在1.7-1.9范围内。
·自动化：可配合大部分核酸自动纯化仪。
| 组分 | 规格 |
| 缓冲液LP1 | 100ml |
| 缓冲液LP2 | 40ml |
| 缓冲液LP3 | 84ml |
| 漂洗液PW | 50ml |
| 洗脱缓冲液TE | 60ml |
| RNaseA（10mg/ml) | 1.25ml |
| 半裙边96孔过滤板 | 2块 |
| 半裙边96孔吸附板CB3 | 2块 |
| 96孔深孔板 | 6块 |
| 封口膜 | 2张 |
储存条件：室温（15-25℃）干燥条件下可保存12个月；更长时间的保存可置于2-8℃。在2-8℃保存条件下，若产生沉淀，使用前应先将试剂盒内的溶液在室温中放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10 min，以溶解沉淀。
注意事项：请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。
1．样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
2．缓冲液LP1可能发黄，并不影响提取效果。
3．若缓冲液LP1或LP2有沉淀析出，可在37℃水浴溶解，摇匀后使用。
4．所有离心步骤均为使用台式离心机，室温下离心。
操作步骤：（离心法）
使用前请先在缓冲液LP3和漂洗液PW中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。
1．处理材料：
取植物新鲜组织100mg或干重组织30 mg，加入液氮充分碾磨。往研磨好的每个样本中加入400μl缓冲液LP1和6 μl RNase A（10 mg/ml)，旋涡振荡1 min，室温放置10 min。
注意：为避免组织还潮，当样本量大时，可提前按上述比例预混缓冲液LP1和RNase A。
2．加入130 μl缓冲液LP2，充分混匀，旋涡振荡1 min。
3．12000rpm（~13400×g )离心5 min。
4．将上述离心后的上清液，转移至96孔过滤板，96孔过滤板置于96孔深孔板上，加盖封口膜。3600rpm（~2,130×g)离心10 min，收集滤液至96孔深孔板。
注意：如果有未研磨彻底的植物组织或可能造成堵孔的大的碎片，请不要转移至96孔过滤板，否则有堵孔的危险。
5．加入滤液1.5倍体积的缓冲液LP3（例如500 μl的滤液加750 μl缓冲液LP3) （使用前请检查是否已加入无水乙醇)，加盖封口膜，立即充分振荡混匀15 s（或用排枪吹打混匀)，此时可能会出现絮状沉淀。
6．将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个96孔吸附板CB3中（吸附板已放置在96孔深孔板)，加盖封口膜。3600rpm（~2,130×g)离心5 min，倒掉废液，96孔吸附板CB3重新放回96孔深孔板。
7．向96孔吸附板CB3中加入600 μl漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，加盖封口膜。3600rpm（~2,130×g)离心5 min，倒掉废液，将96孔吸附板CB3重新放回96孔深孔板。
8．向96孔吸附板CB3中加入600 μl漂洗液PW，加盖封口膜。3600rpm（~2,130×g)离心5 min，倒掉废液。
注意：如果吸附板膜呈现绿色，向96孔吸附板CB3中加入500 μl无水乙醇，3600rpm（~2,130×g)离心5 min，倒掉废液，将96孔吸附板CB3放回96孔深孔板。
9．将96孔吸附板CB3放回96孔深孔板中，3600rpm（~2,130×g)离心5 min，倒掉废液。将96孔吸附板CB3置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
注意：这一步的目的是将吸附板中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
10．将96孔吸附板CB3转入一个干净的96孔深孔板中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200 μl洗脱缓冲液TE，室温放置2-5 min，3600rpm（~2,130×g)离心8 min，将溶液收集到96孔深孔板中。
注意：为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附板CB3中，室温放置2min，3600rpm（~2,130×g)离心8 min。洗脱缓冲液体积不应少于50 μl，体积过小影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。
操作步骤：（负压法）
使用前请先在缓冲液LP3和漂洗液PW中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。
1．处理材料：
取植物新鲜组织100mg或干重组织30 mg，加入液氮充分碾磨。往研磨好的每个样本中加入400μl缓冲液LP1和6 μl RNase A（10 mg/ml)，旋涡振荡1 min，室温放置10 min。
注意：为避免组织还潮，当样本量大时，可提前按上述比例预混缓冲液LP1和RNase A。
2．加入130 μl缓冲液LP2，充分混匀，旋涡振荡1 min。
3．12000rpm（~13400×g )离心5 min。
4．正确连接负压装置，将96孔过滤板CS置于负压装置上，下面放置一个新的96孔深孔板，将负压压力调节至40-70 kpa；将上述离心后的上清液，转移至96孔过滤板CS，打开负压装置开关，抽滤2 min。
5．向收集滤液的96孔深孔板加入滤液1.5倍体积的缓冲液LP3（例如500 μl的滤液加750 μl缓冲液LP3）（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），排枪抽打混匀。
6．将96孔过滤板CS从负压装置上取下，96孔吸附板CB3置于负压装置上，下面放置废液槽，将上一步骤的所有液体及沉淀转移至96孔吸附板CB3，打开负压装置开关，抽滤5 min。
7．向96孔吸附板CB3中加入600 μl漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），打开负压装置开关，抽滤2 min。
8．向96孔吸附板CB3中加入600 μl漂洗液PW，打开负压装置开关，抽滤5 min。
9．关掉负压装置开关，清理废液槽，将96孔吸附板CB3室温放置3 min。
10．96孔吸附板CB3置于负压装置上，下面放置一个新的96孔深孔板，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200 μl洗脱缓冲液TE，室温放置2-5 min，打开负压装置开关，抽滤3-5 min。
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